돼지 유행성 설사 바이러스(PEDV)는 돼지 산업에서 상당한 경제적 손실을 초래하는 알파 코로나바이러스입니다. 기존 백신의 제한된 효능으로 인해 글로벌 돼지 생산에 계속해서 상당한 위협이 되고 있습니다. 세포 경로를 타겟으로 하는 숙주 항바이러스 전략은 진화하는 바이러스 균주와 싸우기 위한 유망한 접근법을 나타냅니다. 콜레스테롤 운반과 PEDV 진입 사이의 강한 상관관계에 대한 이전 연구 결과에 기초하여, 우리는 항-PEDV 활성을 위한 콜레스테롤 조절 화합물 패널을 선별했습니다. 우리는 Niemann-Pick C1 (NPC1) 콜레스테롤 운반체의 억제제인 U18666A를 세포주 및 돼지 장기 오르가노이드에서 여러 PEDV 유전자형에 대해 강력하고 광범위한 억제제로 확인했습니다. NPC1을 관련 약리학적 표적으로 확인하기 위해, 우리는 Huh7 세포에서 CRISPR/Cas9을 사용하여 NPC1을 녹아웃 시켰으며, 이는 PEDV 감염을 유의미하게 억제했습니다. 반대로, 녹아웃 세포에서 NPC1을 강제로 발현시키면 바이러스의 감염성이 부분적으로 복원되었습니다. 실제 PEDV와 PEDV 유사바이러스를 사용하여 NPC1이 PEDV 진입의 내재화를 촉진함을 입증했습니다. 더욱이, 공동 면역침전 및 구조적 모델링은 NPC1과 PEDV 스파이크 단백질의 막 융합 소단위(S2) 사이의 직접적인 상호작용과 NPC2가 이 과정에 관여함을 밝혀내며, NPC1/NPC2 콜레스테롤 운반 복합체가 바이러스의 진입에 직접 참여한다고 나타냅니다. 또한, 외인성 콜레스테롤 보충은 U18666A의 억제 효과를 부분적으로 완화하여, 단순한 콜레스테롤의 존재가 아닌 기능적 세포 내 콜레스테롤 운반이 PEDV 효율적 진입에 필요하다는 점을 강조합니다. 종합적으로, 우리의 연구 결과는 PEDV가 비효율적인 내부화를 위해 숙주의 NPC1/NPC2 콜레스테롤 운반 기계를 활용하는 메커니즘을 설명하며, 이 경로를 광범위한 숙주 지향 항바이러스를 개발하기 위한 유망한 표적으로 식별합니다.