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돼지 폐포 대식세포와 비강 상피세포는 돼지유행성설사바이러스(PEDV)를 흡수하지만 시험관 내에서의 복제를 지원하지 않음

2025-04-04 19:00 | 추천 : 0 | 댓글 : 0
돼지유행성설사바이러스(PEDV)는 주로 대변-구강 노출 후 장세포를 목표로 하여 신생자돈에게 심각한 위장 질환을 유발합니다. 그러나 최근 연구에 따르면 PEDV가 호흡기를 통해 감염되고 복제될 가능성이 있다는 증거가 있습니다. 본 연구는 세포 적응형 비-S INDEL USA PEDV주에 대한 내재적인 항바이러스 및 항염증 면역 반응에 중점을 두어, 돼지 폐포 대식세포(PAMs), 3D4/21 세포(3D4) 및 비강 내 상피세포에서의 PEDV 감염 대안 경로 가능성을 조사하였습니다. CCL-81 세포는 감염의 양성 대조군으로 사용되었으며, 비감염된 CCL-81, PAMs 및 3D4 세포는 음성 대조군으로 사용되었습니다. 세포와 초액(SN)에서의 바이러스 부하는 접종 후 다수의 시간 간격(0, 6, 12, 24, 48, 72, 96 시간)에 RT-qPCR을 통해 정량화되었으며, 전염성 바이러스의 역가는 세포 배양에서 TCID50/ml 및 면역형광(IF) 염색을 통해 평가되었습니다. 24 및 48 시간 후 면역형광(IF)을 통해 PEDV의 포착 및 내재화가 조사되었으며, 투과전자현미경(TEM)을 사용하여 바이러스 입자의 존재와 세포 구조 변화도 평가하였습니다. SN에서의 전염증 및 항바이러스 사이토카인 수치는 ELISA와 Luminex를 통해 측정되었습니다. PAMs와 3D4 세포 모두에서, PEDV RNA 수치는 12 시간 후 세포와 SN에서 정점에 달했으며, 세포 유형 간의 유의한 차이 없이 점차 감소했습니다. PEDV IF가 양성인 PAMs와 3D4 세포는 소수에 불과했으며, 24와 48 시간 간격에서 양성 세포의 증가가 관찰되지 않았습니다. TEM 분석은 바이러스 입자나 세포 소기관의 변화를 나타내지 않았고, 대식세포 유형의 세포에서 전염증 또는 항바이러스 사이토카인 발현이 감지되지 않았습니다. 동시에, 2D 단층 및 공기-액체 계면(ALI)에서 배양된 비강 터빈오르가노이드는 PEDV에 노출되었으며, 24 시간 후 RT-qPCR 및 IF가 수행되었습니다. 사용된 배양 기법과 관계없이, 세포와 SN에서 유사한 수준의 PEDV RNA가 감지되었으며, PEDV IF에 대해 양성 결과가 관찰되었습니다. 전반적으로 PAMs, 3D4 세포 및 비강 상피는 PEDV를 잡아내고 내재화할 수 있지만, 바이러스 복제나 항바이러스 또는 항염증 반응을 유발하지 않았습니다.
Key Points
  • 돼지 폐포 대식세포(PAMs), 3D4 세포 및 비강 상피는 모두 PEDV를 포착하고 내재화할 수 있습니다.
  • 이 세포들은 PEDV의 복제를 지원하지 않으며, 항바이러스 또는 항염증 반응을 일으키지 않습니다.
  • TEM 및 면역형광 분석 결과, 24 및 48시간 후에 PEDV 입자의 존재나 세포 소기관 변화가 관찰되지 않았습니다.