돼지 전염성 폐렴의 병원인인 마이코플라즈마 하이오폐움니아(M. hyopneumoniae)는 양돈업계에서 가장 흔하고 경제적으로 중요한 호흡기 병원체 중 하나입니다. 백신 접종은 M. hyopneumoniae 감염을 통제하기 위한 주요 전략으로 채택됩니다. 라이브 약독화 백신은 경쟁 배제를 통해 초기 폐 정착을 억제하고, 체액성, 점막, 세포 면역을 포함한 다양한 면역 반응을 유도하여 야생형 M. hyopneumoniae에 대한 보호를 제공합니다. 그러나 라이브 약독화 백신 접종과 야생형 감염을 구별할 방법이 없어 썩 널리 사용되지는 않았습니다. 본 연구에서는 리보뉴클레이스 H2 (RNase H2) 절단 원리를 기반으로 하는 정량적 실시간 중합효소 연쇄 반응(qPCR) 방법을 개발했습니다. 이 방법은 약독화 백신 균주의 템플릿에 완전히 상보적인 경우에만 특정 형광 신호를 방출합니다. 이 qPCR 방법은 M. hyopneumoniae 라이브 약독화 백신 (168-L 및 RM48)에 대해 높은 특이성과 민감성을 보였으며, 10 copies/µL로 낮은 검출 한계를 가지고 있습니다. 이 qPCR 방법을 사용하여 168-L 백신 균주의 자돈에서의 세균 배출 동태를 효과적으로 모니터링할 수 있었으며, 백신 접종 후 3일째에 비강 내 첫 검출이, 접종 10일부터 17일 사이에 100%의 최대 검출률이 기록되었습니다. 이 분석법은 M. hyopneumoniae 라이브 약독화 백신 접종 이후, 백신 균주의 호흡기 정착 및 배출을 구체적으로 모니터링할 수 있도록 하여 면역화 효과의 임상 평가에 중요한 기술적 지원을 제공합니다.