아프리카돼지열병 바이러스(ASFV)의 게놈은 단일 선형 이중 나선 DNA 분자로 특징지어집니다. 그러나 ASFV 게놈 DNA가 핵에 들어가는지 여부에 대한 논쟁은 계속되어 왔습니다. 본 연구에서는 DNAscope in situ hybridization (ISH) 기술을 사용하여 ASFV의 게놈 DNA를 추적했습니다. ASFV HLJ/18 변종의 DNA를 겨냥한 특정 프로브들이 설계되고 합성되어 ASFV에 감염된 돼지 폐포 대식세포(PAMs)에서 ASFV DNA의 성공적인 검출이 가능했습니다. ASFV 게놈 DNA의 검출은 감염 후 2시간 (hpi) 만에 시작되었으며, 시간의 경과에 따라 DNA 신호가 점진적으로 증가했습니다. 8 hpi에서 ASFV DNA는 주로 핵 바이러스 공장(VFs) 주변에 위치했으며, 바이러스 복제가 계속됨에 따라 검출된 DNA에 연관된 형광 신호는 증가하고 VFs를 넘어 추가적인 세포질 영역에 이르렀습니다. 20 hpi 이후, 형광 신호는 안정 상태에 도달했습니다. 또한, 공초점 Z-스택 이미징을 통해 ASFV DNA 신호가 ASFV 감염의 모든 단계에서 핵에 존재하지 않는다는 중요한 증거를 제공합니다.
Key Points
- DNAscope in situ hybridization 기술을 사용하여 ASFV 할린적 게놈 DNA를 체계적으로 추적 및 관찰했습니다.
- 2시간 감염 후, 흡기 대식세포 안에서 ASFV DNA가 빠르게 검출되기 시작했고, 시간이 지나면서 점점 더 많은 신호가 파악되었습니다.
- 공초점 Z-스택 이미징 결과, ASFV 게놈 DNA는 감염의 모든 단계에서 핵 내에 존재하지 않았으며, 이는 ASFV 게놈의 위치에 관한 중요한 증거를 제공합니다.