아프리카돼지열병 바이러스(ASFV)는 전 세계적으로 돼지 집단에 치명적인 유행병을 일으킵니다. 야생 타입과 새로운 유전자 결실 변종(예: ASFV-ΔI177L)의 공존은 변종 식별을 위한 신속한 현장 진단 도구의 필요성을 증대시키며, 이는 적시 질병 통제와 맞춤형 농장 관리에 매우 중요합니다. 본 연구에서는 다중 RPA와 CRISPR/Cas12a를 결합하여 ASFV 보존 서열 및 유전자 결실 변종의 특정 형광 마커(eGFP/mCherry)를 타겟으로 하는 현장 배치 가능한, 추출이 필요 없는 원팟 분석(CORDSv2)을 개발하였습니다. 본 분석은 초민감 검출(LOD: 6 copies/μL)을 달성하였고, 96개의 현장 샘플을 대상으로 97.9%의 정확성을 보였습니다. 현장 작업을 간소화하기 위해, 혈청/타액을 대상으로 한 추출 불필요 프로토콜을 동결 건조된 시약 미소구와 통합하여 최소한의 수작업으로 안정적인 보관 및 직접 사용을 가능하게 하였습니다. 휴대용 형광측정기(hippoCORDS)와 결합할 때, 시스템은 한 단계, 즉 용해액을 미소구에 추가하는 것만으로 1시간 내에 전체 샘플에서 결과 도출까지 완료됩니다. 이 견고하고 휴대 가능한 시스템은 간단한 현장 ASFV 변종 감시의 긴급한 필요를 해결하며, 다른 고위험 병원체에도 적응 가능합니다.