배경/목적: 보호 항원의 부적절한 특성화는 아프리카돼지열병(ASF) 백신 개발에 상당한 도전 과제를 제시하며, 특히 단백질 의존성 제형인 서브유닛, mRNA 및 재조합 바이러스 벡터 백신에서 그렇습니다. 이를 해결하기 위해, 우리는 아프리카돼지열병바이러스(ASFV) 항원을 선별하고 이를 나노입자 전달 플랫폼을 사용하여 면역원을 강화하고자 하였습니다. 방법: 여섯 가지 ASFV 항원(p30, p54, pE120R, pH124R, pE184L, CD2v)을 정제하여 각각 돼지를 면역화하는 데 사용하였습니다. 이 여섯 항원에 의해 유도된 항체가 ASFV 복제 또는 혈괴흡착에 미치는 영향을 돼지 폐포 대식세포(PAM)에서 평가하였습니다. 이 여섯 항원은 각각 SpyTag/SpyCatcher를 통해 페리틴에 결합되어 여섯 개의 페리틴 나노입자를 제조하였습니다. 여섯 혼합 항원의 칵테일 또는 여섯 혼합 나노입자의 칵테일을 사용하여 돼지를 각각 면역화하고, 유도된 체액성 및 세포성 면역 반응의 차이를 비교하였습니다. 결과: p30, p54, pE120R, pH124R, pE184L에 대한 면역화된 돼지의 항체는 PAM에서 ASFV 복제를 현저히 억제하였으며, 반면 항-CD2v 항체는 ASFV의 혈괴흡착을 특이적으로 방해했습니다. 주목할 점은, 이러한 항원 결합 나노입자 칵테일로 면역화하면 항원 단량체 칵테일로 면역화하는 것보다 더 강력한 바이러스 억제 항체 반응을 유도한다는 것입니다. 더욱이, 나노입자 면역화는 혈청 IFN-γ 증가, ASFV 특이적 IFN-γ 분비 세포 수 증가 및 CD8+ T 세포 인구 확대를 통해 강력한 세포 면역을 유도하였습니다. 결론: 우리의 연구는 유망한 ASFV 항원 후보군을 식별하고, 페리틴 나노입자 전달이 ASFV에 대한 체액성 및 세포성 면역 반응을 시너지적으로 강화하여 다항원 ASF 백신 설계에 합리적인 전략을 제공한다고 설명합니다.