아프리카돼지열병(ASF)은 가축 돼지와 야생 멧돼지에게 치명적인 바이러스 질환으로, 상당한 경제적 결과를 초래합니다. 원인 병원체는 큰 이중 가닥의 DNA 바이러스로, 150개 이상의 단백질을 암호화하며, 이 중 많은 단백질의 기능이 알려져 있지 않습니다. 이러한 단백질의 항원적 특성에 대한 제한된 지식은 ASFV에 대한 백신 개발을 저해하고 있습니다. 기존 연구에서는 K145R 단백질이 반응 면역성을 지니며 ASFV 감염 세포에서 풍부하게 발현된다고 밝혀졌습니다. 본 연구에서는 E. coli에서 발현된 K145R 단백질에 대해 6개의 단일클론 항체(mAbs)를 생성하고 특성화했습니다. ELISA, Western blot, 면역형광검사(IFA)를 통해 mAbs가 K145R 단백질과 ASFV 감염 세포에 대해 특별하고 강하게 반응함을 보여줍니다. mAbs의 주요 선형 B세포 에피토프를 식별하기 위해 말토스 결합단백질(MBP) 태그와 함께, 일련의 절단된 재조합 K145R 단백질를 E. coli에서 구성하고, 발현하고, 분석했습니다. 모든 mAbs는 K145R의 C-말단 영역에 위치한 선형 에피토프 133TWAKIVEEG141을 인식했습니다. 알라닌 주사 돌연변이 분석을 사용한 추가 연구에서는 트립토판(W134)과 알라닌(A135)이 에피토프-항체 상호작용에 중요한 아미노산 잔기임을 밝혔습니다. 이 선형 에피토프는 간접 ELISA에서 ASFV 양성 혈청과 특정 반응을 보였으며, ASFV 양성 및 음성 돼지 혈청을 구별할 수 있었습니다. 이 mAbs와 정의된 에피토프는 K145R의 구조와 면역학적 특성을 이해하는 데 추가 정보를 제공하여, ASFV에 대한 에피토프 기반 진단 도구 개발의 기초를 마련할 것입니다.