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장열성 대장균이 생산하는 열민감성 장독소를 민감하게 감지할 수 있는 향상된 면역 크로마토그래피 검사 스트립

2025-10-19 19:02 | 추천 : 0 | 댓글 : 0
장열성 대장균(ETEC)은 사람뿐만 아니라 돼지에서 이유 후 설사를 유발하는 등 가축에서도 수용성 설사를 일으킬 수 있습니다. ETEC의 주된 원인은 열민감성 장독소(LT)와 열안정성 장독소(ST)이기 때문에, 이러한 독소를 신속하게 감지할 수 있는 방법이 필요합니다. 우리는 이전에 쥐의 모노클론 항체(mAb)와 토끼의 폴리클론 항체로 구성된 LT용 항체 크로마토그래피(IC) 검사 스트립을 보고했습니다. 그러나 이 검사 스트립은 독소 감지 한계가 불충분했고, 테스트 샘플 박테리아는 LT 생성을 증가시키기 위해 린코마이신 추가와 함께 하룻밤 동안 배양해야 했습니다. 게다가 ST용 IC 검사 스트립은 존재하지 않았습니다. 따라서 우리는 LT의 B 소단위(LTB)와 ST를 결합한 키메라 단백질을 제작하고, 이들을 타겟으로 쥐를 면역화하여 LTB와 ST에 대한 모노클론 항체를 개발하려 했습니다. 아홉 개의 항원 특이적 mAb 클론을 얻었지만, 모두가 LTB 특이적이었습니다. mAb 31D11과 mAb 34D4 쌍으로 준비된 IC 검사 스트립은 정제된 LT 0.15 ng/150 μL를 감지할 수 있었습니다. 또한, 이 IC 검사 스트립은 린코마이신 보충제를 필요로 하지 않고도 돼지 및 인체에서 수집한 임상 분리주의 6시간 배양 상청액에서 LT를 감지할 수 있었습니다. 샌드위치 ELISA를 사용한 LT 수준의 정량화는 IC 결과를 뒷받침하며, 향상된 IC 검사 스트립이 보충제가 필요 없이 더 낮은 농도에서 LT를 감지할 수 있으며, 이전 방법보다 더 짧은 배양 시간으로 감지할 수 있음을 나타냅니다. 이 검사 스트립은 식품 위생 및 축산 위생 분야에서 ETEC 감지에 유용할 것입니다.
Key Points
  • 이 연구에서는 ETEC의 주요 원인물질인 열민감성 장독소(LT)와 열안정성 장독소(ST)를 신속하게 감지할 수 있는 향상된 면역 크로마토그래피(IC) 검사 스트립을 개발했습니다.
  • 잘못된 방법으로 온밤 배양과 린코마이신 보충을 필요로 했던 기존 방법과 달리, 새 검사 스트립은 ST 없이 LT를 6시간 배양한 임상 샘플에서 감지할 수 있으며, 더 낮은 농도에서도 감지할 수 있습니다.
  • 향상된 IC 검사 스트립은 식품 위생 및 축산 위생 분야에서 ETEC 검출에 도움이 될 수 있습니다.