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PEDV 및 PoRVA의 신속 탐지를 위한 다중효소 등온 급속 증폭(MIRA)-LFD 검사

2025-10-12 19:01 | 추천 : 0 | 댓글 : 0
돼지 유행성 설사 바이러스(PEDV)와 돼지 로타바이러스 A(PoRVA)는 돼지의 바이러스성 설사의 주 병원체로, 전 세계 양돈 생산에 상당한 경제적 손실을 초래하고 있습니다. 기존의 탐지 방법인 바이러스 분리법, ELISA, PCR은 결과를 얻기까지 긴 시간이 소요되고, 전문 장비를 필요로 하며, 민감도가 낮아 신속한 현장 진단에 제한이 있습니다. 본 연구에서는 PEDV와 PoRVA를 신속하고 민감하게 시각적으로 파악할 수 있는 현장 탐지 플랫폼인 RT-MIRA-LFD를 개발하였습니다. 이 플랫폼은 다중효소 등온 급속 증폭(MIRA)과 측면흐름 디스틱(LFD)를 활용합니다. PEDV N 및 PoRVA VP6 유전자의 보존된 영역을 대상으로 5'-6-FAM 및 5'-비오틴 변형이 있는 전방 및 역방향 프라이머가 설계되어 MIRA 증폭과 LFD 판독 간의 원활한 통합을 가능하게 했습니다. 민감도 테스트에서는 플라스미드 표준에 대해 PEDV 20 복사 수/μL, PoRVA 4.5 복사 수/μL의 검출 한계를 나타냈습니다. 두 검사 모두 TGEV, PDCoV, CSFV 또는 기타 일반적인 돼지 병원체와 교차 반응을 보이지 않아 높은 특이성을 확인했습니다. 50개의 항문 면봉 샘플로 임상 검증을 수행한 결과 RT-qPCR과의 일치율은 PEDV 98%, PoRVA 96%를 나타냈으며, 카파 값은 각각 0.92와 0.96으로 지지되었습니다. 전체 작업 과정은 30분 내로 완료되며, 복잡한 장비를 우회하고 직접적인 시각적 해석이 가능하여 현장 탐지 효율성을 크게 향상시켰습니다. 이 RT-MIRA-LFD 플랫폼은 특히 자원이 제한된 환경에서 PEDV와 PoRVA의 조기 진단, 발병 모니터링 및 목표 제어에 실용적인 솔루션을 제공하여 양돈 사업의 경제적 영향을 줄이는 노력을 지원합니다.
Key Points
  • RT-MIRA-LFD 플랫폼은 PEDV 및 PoRVA를 신속하고 민감하게 탐지할 수 있는 현장 탐지 솔루션을 제공합니다.
  • RT-MIRA-LFD는 30분 내에 전체 작업 과정을 완료하며, 복잡한 장비 없이 직접적인 시각적 해석이 가능합니다.
  • 임상 검증 결과, RT-qPCR과의 일치율은 PEDV 98%, PoRVA 96%를 보여 높은 신뢰성을 입증하였습니다.