돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스(PRRSV)는 세계 돼지 산업에 심각한 위협을 가하는 중요한 병원체입니다. 이 연구에서는 높은 병원성을 가지는 PRRSV(HP-PRRSV) 균주를 사용하여 BAC 기반 역유전학 플랫폼을 구축했습니다. 세 가지 재조합 보고 바이러스는 완성된 PRRSV-L251 게놈의 세 가지 다른 유전체 사이 영역에 강화 녹색 형광 단백질(EGFP) 유전자를 삽입하여 구축되었습니다. 면역형광 검사와 바이러스 성장 동력학 및 보고 유전자 안정성 평가를 통해 rL251-ORF4-5a-EGFP는 연속적인 패세지에서도 비교적 안정적인 발현을 유지하며, 감염 후 72시간에서의 바이러스 역가는 부모 바이러스와 비슷했습니다. 그 후, rPRRSV-L251-ORF4-5a-EGFP를 사용하여 잠재적인 항-PRRSV 활성을 가진 네 가지 후보 물질을 확인하였으며, 이는 이 플랫폼이 항바이러스 약물 스크리닝을 위한 시각적 평가 도구로 사용될 수 있음을 나타냅니다. 이 연구는 ORF4-5a 간격 영역이 외래 유전자를 삽입하기 위한 실용적이고 유망한 위치임을 보여주었으며, PRRSV 백신 개발 및 병원성 연구를 위한 견고한 기술 플랫폼을 제공했습니다.