목적: 안구의 주요 구조를 조직학적으로 시각화하기 위해 파라핀 절단 준비 프로토콜을 최적화하는 연구입니다. 방법: 2022년 9월부터 2024년 9월까지 진행된 실험 연구이며, 첫 번째 실험에서는 무작위 숫자표 방법에 의해 18개의 돼지 안구를 5개의 그룹(6개의 하위 그룹)으로 나누었습니다. 세 종류의 고정액을 테스트했습니다: 데이비슨 용액(데이비슨 그룹), 1% 파라포름알데히드와 1.25% 글루타르알데히드 혼합물(혼합 용액 그룹), 4% 파라포름알데히드(포름알데히드 그룹). 각각의 고정액은 실온과 4℃에서 적용되었습니다. 헤마톡실린과 에오신으로 염색된 파라핀 절편을 준비하여 각막, 수정체, 전방각, 섬모체, Zinn의 죔줄, 공막 및 망막의 기본적인 품질과 형태 조건을 평가했습니다. 두 번째 실험에서는 돼지 안구 33개를 무작위 숫자표 방법으로 4개의 그룹(11개의 하위 그룹)으로 나누어 다양한 전처리 방법의 효과를 평가했습니다. 섹션의 품질은 일반적으로 사용되는 임상 해부 방법, 표준 해부 절차, 반절 안구 및 처리되지 않은 대조 그룹 간에 점수화하고 비교했습니다. 최적의 전처리 및 고정 조건은 6개의 인간 안구(노인 남성 3명 및 청소년 남성 3명)를 사용하여 검증했습니다. 통계 분석은 Kruskal-Wallis H 테스트, Dunn 테스트, Bonferroni 보정, 쌍체 t-테스트 및 Mann-Whitney U 테스트를 사용하여 수행했습니다. 결과: 데이비슨 그룹은 거친 안구 표면, 불투명 수정체 및 검은 공막을 보였습니다. 반면, 혼합 용액 그룹은 매끄러운 표면을 유지했으며, 각막과 공막의 황변 및 수정체 투명도를 보여주었습니다. 포름알데히드 그룹도 매끄러운 표면을 보였으나 수정체는 약간 불투명하게 나타났습니다. 혼합 용액 그룹은 수정체 형태(8.00±1.95)와 Zinn의 죔줄(3.17±1.27)에 대해 데이비슨 그룹(6.17±1.03 및 1.83±0.94, 둘 다 P<0.05)보다 유의하게 높은 점수를 보였으며, 포름알데히드 그룹(1.50±0.67 및 2.92±0.79, 둘 다 P<0.05)과 비교하여 Zinn의 죔줄 및 망막 형태(5.58±1.83)에서도 유의하게 높은 점수를 보였습니다. 전안부 총점수(27.67±4.74)는 데이비슨 그룹(22.83±2.98, P<0.05)보다 혼합 용액 그룹에서 유의하게 높았습니다. 전안부 총점수와 전체 절편 품질 점수(40.58±7.53)는 포름알데히드 그룹(23.17±3.04 및 32.42±4.01, 둘 다 P<0.05)에 비해 혼합 용액 그룹에서 유의하게 높았습니다. 4℃에서의 고정 조건은 실온에서의 고정(1.83±1.29, P<0.05)에 비해 Zinn의 죔줄 보존이 더 잘 되었습니다. 전처리 방법 중에서 임상 접근 방식 그룹은 섬모체(7.04±1.30), Zinn의 죔줄(2.96±0.95), 공막(6.63±1.38), 망막(5.17±1.58) 및 전체 절편 품질(36.75±4.63)에 대해 반절 표본(all P<0.05)보다 높은 점수를 얻었습니다. 최적의 전처리 방법(0.5cm 각막 윤부 절개)과 고정 조건(4℃에서의 혼합 용액)을 인간 안구에 적용하여 주요 구조물인 섬모체, 수정체, Zinn의 죔줄 및 안구벽을 성공적으로 보존하고 명확하게 시각화하는 데 성공했습니다. 결론: 임상 방법(예: 각막 윤부 절개)을 사용한 전처리와 4℃의 파라포름알데히드-글루타르알데히드 혼합물에서의 고정을 결합하면 파라핀 절편에서 주요 안구 구조물의 보존 및 시각화를 크게 향상시킵니다. 이 방법은 인간 안구의 조직병리학적 평가를 개선할 가능성을 보여줍니다.
Key Points
- 혼합 용액 및 4℃의 고정 조건은 Zinn의 죔줄과 수정체를 효과적으로 보존하며, 전체 섹션 품질을 높입니다.
- 임상 전처리 방법(각막 윤부 절개법)은 돼지와 인간 안구의 주요 구조를 보존하고 시각화하는 데 탁월한 결과를 제공합니다.
- 이 최적화된 방법은 인간 안구의 조직병리학적 평가를 개선하는 잠재력을 지니고 있습니다.