돼지 생식기 및 호흡기 증후군 바이러스(PRRSV)는 아르테리비리대 과에 속하는 외피 RNA 바이러스로, 주요한 돼지 병원체입니다. 우리는 효모 변형 연관 재조합(TAR) 클로닝을 사용하여 감염성 PRRSV 및 GFP 발현 클론을 효율적으로 생성하였고, 안정적인 외래 유전자 발현에 필수적인 전사 조절 서열을 확인했습니다. SARS-CoV-2 항바이러스를 스크리닝한 결과, 리바비린과 중합효소 억제제인 렘데시비르 및 그 대사체인 GS-441524가 강력한 억제 효과를 나타냈습니다. 중합효소를 다른 메커니즘으로 타겟팅하는 몰누피라비르는 PRRSV에 대해 효과가 감소하였으며, 프로테아제 억제제인 GC376은 효과가 없었습니다. AlphaFold가 예측한 PRRSV 중합효소의 구조는 SARS-CoV-2 중합효소와 보존된 촉매 구조를 보여주어 크로스 패밀리 억제제 활성의 근거를 설명합니다. 반면, 프로테아제에서의 구조적 차이는 GC376의 비효과성과 상관되었습니다. 이러한 발견은 아르테리바이러스 공학에 있어 TAR 클로닝의 유용성을 강조하며, 벡터 백신 개발에도 잠재적 응용이 있을 수 있습니다.
Key Points
- TAR 클로닝을 통해 PRRSV와 GFP 발현 클론을 효율적으로 생성하였으며, 안정적인 외래 유전자 발현을 위한 전사 조절 서열이 필수적임을 확인했습니다.
- SARS-CoV-2 항바이러스제 스크리닝 결과, 리바비린, 렘데시비르, GS-441524는 강력한 억제 효과를 나타냈으나, 몰누피라비르는 효과가 감소하고 GC376은 효과가 없었습니다.
- PRRSV 중합효소와 SARS-CoV-2 중합효소의 보존된 촉매 구조는 크로스 패밀리 억제제의 효과를 설명하며, 이 연구는 벡터 백신 개발에 기여할 수 있습니다.