구제역(FMD)은 쌍발굽 동물에서 가장 전염성이 강한 바이러스 질병 중 하나로, 전 세계적으로 막대한 경제적 손실을 초래합니다. FMD 바이러스(FMDV) 특정 비구조 단백질(NSP) 항체는 현재 또는 과거의 FMDV 감염을 나타내며, FMDV의 7개 혈청형(O, A, C, Asia1, SAT1, SAT2, SAT3) 모두에 해당될 수 있습니다. 이번 연구에서는 하이브리도마 시스템을 통해 재조합 FMDV NSP 3AB3 (r3AB3)에 대한 단클론 항체(MAb)를 개발하여, NSP 항체 검출을 위한 경쟁적 효소결합 면역흡착검사(cELISA)에 적용하였습니다. 새로 생성된 MAb #FMDV3AB-2E4는 IgG1 유형이며, 특별히 NSP 3B와 결합합니다. 'FMDV3AB-2E4 cELISA'라는 이름을 가진 이 cELISA는 r3AB3를 항원으로 사용하여 개발되었습니다. cELISA의 저해율(PI) 컷오프는 소, 물소, 양, 염소, 돼지 및 사슴을 포함한 여러 종의 FMDV 양성 202개와 음성 730개의 혈청 샘플에 대한 수신자 조작 특성 곡선 분석을 통해 결정되었습니다. 선택된 컷오프 값인 45 PI에서, cELISA는 95.54%의 진단 민감도(DSn)와 98.36%의 진단 특이도(DSp)를 95% 신뢰 구간에서 나타냈습니다. 상업적으로 사용되는 'PrioCHECK FMD NS' 테스트와 비교했을 때, 본 cELISA의 DSn은 93.54%, DSp는 97.46%로, FMDV 감염 및 백신 접종을 받은 동물로부터 수집된 소와 염소의 혈청(n = 446)에 대해 일치율을 보였습니다. 새로운 cELISA와 널리 사용되는 사내 r3AB3 간접 ELISA의 일치율은 인도 전역에서 수집된 3016개의 소 혈청 테스트 결과에 대해 96.61%였습니다. 모든 종에 무관하게 적용할 수 있는 이 NSP 항체 검출 테스트는 인도 및 다른 나라의 구제역 통제 노력에 유용한 도구가 될 것입니다.
Key Points
- 이번 연구에서는 재조합 구제역 바이러스 NSP 3AB3에 대한 새로운 단클론 항체를 개발하여, 이를 기반으로 경쟁적 ELISA 시스템을 구축하였습니다.
- 새로운 cELISA는 45 PI의 컷오프 값에서 매우 높은 진단 민감도(95.54%)와 특이도(98.36%)를 보여주었으며, 상업적 NS 테스트와 비교 시 유사한 성능을 보였습니다.
- 모든 종에 적용 가능한 이 NSP 항체 검출 방법은 인도뿐 아니라 다른 나라들의 구제역 통제에 유용하게 적용될 것입니다.