배경/목적: 보호 항원의 충분한 특성 규명 부족은 아프리카돼지열병(ASF) 백신, 특히 항원 의존적 제형인 서브유닛, mRNA, 재조합 바이럴 벡터 백신 개발에 있어 중요한 도전 과제가 되고 있습니다. 이를 해결하기 위해 본 연구에서는 ASFV 항원의 스크리닝 및 이들의 면역원성을 높이기 위한 나노입자 전달 플랫폼을 적용하였습니다. 방법: p30, p54, pE120R, pH124R, pE184L, CD2v 등 6종의 ASFV 항원을 정제하여 각각 돼지에 면역하였으며, 해당 단백질들로 유도된 항체가 1차 돼지 폐포 대식세포(PAMs)에서 ASFV 복제 또는 적혈구 흡착에 미치는 효과를 평가하였습니다. 각 항원은 SpyTag/SpyCatcher 시스템을 이용해 페리틴에 결합하여 6종의 각각의 페리틴 나노입자를 제작하였고, 이를 혼합한 항원 칵테일과 나노입자 칵테일을 각각 돼지에 면역하여 체액성 및 세포성 면역 반응 유도 효과를 비교하였습니다. 결과: 면역된 돼지에서 생성된 항-p30, p54, pE120R, pH124R, pE184L 항체는 PAMs 내 ASFV 복제를 유의미하게 억제하였고, anti-CD2v 항체는 ASFV의 적혈구 흡착을 특이적으로 차단하였습니다. 특히, 항원을 페리틴 나노입자에 결합한 칵테일의 면역은 항원 단일체 칵테일에 비해 더욱 강력한 바이러스 억제 항체 반응을 유도하였습니다. 더불어, 나노입자 백신은 혈청 내 IFN-γ 증가, ASFV 특이적 IFN-γ 분비 세포수 증가, CD8+ T 세포 집단 확대 등 강력한 세포성 면역반응을 유도하였습니다. 결론: 본 연구는 유망한 ASFV 항원 후보군을 제시하였으며, 페리틴 나노입자 전달이 ASFV에 대한 체액성 및 세포성 면역반응을 시너지 효과로 증강시킨다는 점을 입증하여, 다중 항원 ASF 백신 설계를 위한 합리적 전략을 제공합니다.