아프리카돼지열병(ASF)은 가정용 돼지와 야생 멧돼지에 치명적인 바이러스 질병으로, 막대한 경제적 손실을 초래합니다. 이 질병의 원인인자는 큰 이중 나선 DNA 바이러스로, 기능이 알려지지 않은 150개 이상의 단백질을 암호화합니다. 이러한 단백질의 항원 특성에 대한 제한된 지식은 ASFV에 대한 백신 개발을 저해해 왔습니다. 이전 연구에 따르면, K145R 단백질은 면역원성이 있으며 ASFV에 감염된 세포에서 풍부하게 발현됩니다. 본 연구에서는 E. coli에서 발현된 K145R 단백질에 대해 여섯 개의 단일클론 항체(mAbs)를 생성하고 특성화했습니다. ELISA, 서부 블롯 및 면역 형광 분석(IFA)을 통해 mAbs가 K145R 단백질과 ASFV 감염 세포에 대해 특정하고 강하게 반응한다는 것을 입증했습니다. mAbs의 주요 선형 B 세포 에피토프를 식별하기 위해, 엽당 결합 단백질(MBP) 태그를 가진 일련의 절단형 재조합 K145R 단백질을 구축하고 E. coli에서 발현하여 분석했습니다. 모든 mAbs는 K145R의 C-말단 부위에 위치한 선형 에피토프, 즉 133TWAKIVEEG141 서열을 특정적으로 인식했습니다. 알라닌 스캔 돌연변이 분석을 통해 트립토판(W134)과 알라닌(A135)이 에피토프-항체 상호작용에 중요한 아미노산 잔류물임이 밝혀졌습니다. 이 선형 에피토프는 ASFV 양성 혈청과 간접 ELISA에서 특정 반응을 보였으며, ASFV 양성 및 음성 돼지 혈청을 구별할 수 있었습니다. 이 mAbs와 정의된 에피토프는 K145R의 구조와 면역학적 특성을 이해하는 데 추가 정보를 제공하며, ASFV에 대한 에피토프 기반 진단 도구 개발을 위한 기초를 마련할 것입니다.