돼지 표피 성장 인자(PoEGF)는 이유된 자돈에서 장 상피 발달을 촉진하고 면역 기능을 향상시켜 사료 첨가 항생제의 대안으로 잠재력을 제공합니다. 그러나 재조합 PoEGF(rPoEGF)의 대량 적용은 높은 생산 비용과 복잡한 정제 요구사항으로 인해 제한되고 있습니다. 본 연구에서는 α-인자 신호 펩타이드-PoEGF-6×His 발현 카세트를 통합하여 rPoEGF를 발현 및 분비할 수 있는 재조합 Saccharomyces cerevisiae INVSc1 균주를 구축하였습니다. 발현은 SDS-PAGE 및 Western 블롯 분석을 통해 확인되었으며, BALB/c 3T3 섬유아세포 증식 분석을 통해 생리활성이 검증되었습니다. 최대 유사분열 활성은 10,963 U/mL에 달했습니다. 생산 효율을 개선하기 위해 2단계 발효 전략이 개발 및 최적화되었으며 4L 발효기에서 수행되었습니다. 이 과정은 포도당 기반의 생장 단계 배양 후 최적 조건(25 °C, pH 5.0, DO 30%)에서 갈락토오스를 유도체로 이용하는 발현 단계를 포함합니다. 이 접근법은 고밀도 세포 배양(OD600 ≈ 71.5)을 가능하게 하고 최종 분비 단백질 수확량은 30.2 mg/L에 도달하였습니다. 특히 활성 rPoEGF가 포함된 배양물은 다운스트림 정제 없이 즉시 기능성 사료 첨가제로 활용될 수 있습니다. 이러한 결과는 생리활성이 있는 rPoEGF를 생산하기 위한 실용적이고 대규모 확장이 가능하며 비용 효과적인 접근법을 제시하며, 이를 안전한 무항생제 성장 촉진제로 돼지 생산에 활용할 수 있는 미래의 기반을 지원합니다.