롤링 서클 증폭(RCA)은 등온 간단함 덕분에 핵산 검출에 혁명을 가져왔습니다. 그러나, 20년이 넘는 임상 적용은 비특이적 증폭과 이중 나선 DNA(dsDNA)와의 비호환성으로 인해 방해받아 왔습니다. 여기서는 아프리카돼지열병 바이러스(ASFV)의 핵산 식별을 위한 전략으로, dsDNA를 타겟으로 하는 CRISPR/Cas12a에 의해 합리적으로 설계된 DNA/RNA 키메라 헤어핀 프리프라이머를 절단하여 RCA를 시작하기 위한 ssRNA를 방출하는 전략(SCOPE-RCA)을 제안합니다. CRISPR/Cas12a의 전 절단 능력을 활용하여, SCOPE-RCA 시스템은 20분 이내에 99%의 단일 가닥 DNA(ssDNA) 절단을 달성하여 비특이적 증폭을 크게 억제합니다. 동시에, RNA가 RCA 활성화제로 작용하는 DNA/RNA 키메라 헤어핀 프라이머를 사용하여 dsDNA를 ssRNA로 변환하며, 이로써 dsDNA 호환 RCA가 가능해집니다. 최종적으로, 촉매 헤어핀 조립(CHA)과 표면 증강 라만 산란(SERS) 신호 증폭과 연계하여, SCOPE-RCA 시스템은 모의 감염된 샘플에서 최소 59 복사본/mL 수준으로 ASFV를 검출할 수 있습니다. 사용의 용이성과 초정밀 검출 능력을 갖춘 SCOPE-RCA 시스템은 핵산 연구 및 임상 응용 분야에서 상당한 잠재력을 보여줍니다.