아프리카돼지열병바이러스(ASFV)는 돼지에서 치명적인 질병을 일으키는 대형 DNA 바이러스로, 현재 효과적인 백신이나 항바이러스 치료제가 없습니다. 우리는 콜리신 E9의 DNase 도메인(DNase E9)과 그 억제제 Im9을 바이러스 프로테이스 절단 부위와 결합한 단백질 스위치를 설계했습니다. 이 복합체는 ASFV pS273R 프로테이스가 존재할 때만 파괴되어 DNase 활성을 방출합니다. 여러 Im9 변이를 노출된 루프에 pS273R 프로테이스 절단 서열을 삽입하여 제작하였습니다. 그 중에서 우리는 프로테이스 부재 시에도 여전히 높은 안정성을 유지하며 DNase E9에 강하게 결합하여 그 활성을 억제하는 최적화된 변형체(Im9-1.4)를 확인했습니다. ASFV 프로테이스에 노출되면 Im9-1.4가 절단되어 DNase E9의 활성을 억제할 수 없게 됩니다. In vitro 실험은 pS273R 프로테이스에 의한 효소 분해가 DNase E9/Im9-1.4 복합체를 촉매적으로 활성화시킨다는 것을 확인했습니다. 이 바이러스 유발 '킬 스위치'는 바이러스 DNA의 분해를 통해 감염을 종결시킴으로써 돼지 세포가 ASFV에 비허용성을 가지도록 설계되었습니다. 우리의 연구는 바이러스에 의해 암호화된 프로테이스를 사용하여 휴면상태의 메커니즘을 유발하는 일반화 가능한 합성 생물학 전략을 제시하며, 이 프로테이스 감지 DNase로 그 예를 보여줍니다. 이 합성 제한 시스템은 ASFV에 저항성을 가진 돼지를 개발하는데 사용될 수 있습니다.