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돼지 델타코로나바이러스의 S2 서브유닛에 대한 단클론 항체의 선형 B 세포 에피토프 식별 및 특성화

2025-08-29 19:01
돼지 델타코로나바이러스(PDCoV)는 어린 돼지에게 높은 사망률을 보이며 잠재적인 종 간 전염 위험성을 가진 신흥 돼지 장관 병원체입니다. 바이러스 침입에 중요한 거대 분자인 스파이크(S) 단백질은 여전히 PDCoV에서 충분히 연구되지 않았습니다. 본 연구에서는 하이브리도마 기술을 사용하여 PDCoV S2 서브유닛에 대한 두 가지 단클론 항체(mAb 2E9 및 11E5)를 생성했습니다. 두 단클론 항체 모두 면역형광, ELISA, 웨스턴 블롯을 통해 PDCoV를 특이적으로 검출했으며 전염성 위장염 바이러스, 돼지 전염성 설사 바이러스, 돼지 사펠로바이러스, 돼지 아스트로바이러스 5에는 교차 반응성이 없었습니다. mAb 2E9 및 11E5를 사용하여 중화 항체 샌드위치 ELISA를 개발하여 이 두 항체가 PDCoV S2 서브유닛에 대한 특이성을 확인했습니다. 잘린 단백질 분석을 통해 21PSAF24 (2E9) 및 52NSRC55 (11E5)의 두 가지 선형 B-세포 에피토프를 확인했습니다. 구조적 분석 결과, 두 에피토프 모두 S2 서브유닛의 표면에 노출되어 있으며 24개의 PDCoV 균주에서 고도로 보존되어 있음이 드러났고, 서로 다른 PDCoV 유전자형에서 8개의 잔기(-21PSAF24 및 52NSRC55-)가 관찰되었습니다. S2 서브유닛 단백질에 대한 mAb 2E9와 11E5의 친화도는 각각 4.146 nM 및 2.133 nM으로 결정되었습니다. 전반적으로, 이러한 발견은 PDCoV S 단백질의 구조와 기능에 대한 이해를 발전시키며, 백신 설계 및 PDCoV 진단 방법 개발에 잠재적인 응용 가능성을 제시합니다.