시험관 내 림프구 증식 측정은 면역 반응 및 항증식 약물의 효능을 평가하는 데 필수적입니다. 이러한 측정은 항원 제시나 미토젠 자극에 의존하며, 시약 농도와 배양 시간이 성능을 결정합니다. 비장 세포가 자주 사용되지만 말초혈액 단핵구세포(PBMC)는 접근이 용이하고 실용적인 샘플링을 제공합니다. 그러나 돼지 PBMC의 증식에 대해 강력한 배치 분석을 포함한 간소화된 프로토콜이 부족했습니다. 따라서 우리는 5 μg/mL의 concanavalin A (ConA)를 사용해 영구보관된 돼지 PBMC의 증식을 유도하는 상세한 작업 흐름을 개발했습니다. 이 프로토콜은 세포 분리, 냉동 보존, ConA 자극, CD4+ T-세포 염색, Attune NxT 장비를 이용한 유세포 분석 획득 및 게이팅, 그리고 FCS ExpressTM 7.18 소프트웨어를 통한 일괄 분석을 포괄합니다. 이 접근법은 78.9%의 생존 세포를 산출했으며, 그 중 33.8%는 CD4+ 림프구였습니다. 또한 93.9% (n = 216)의 세포가 증식했으며 최대 아홉 번의 세포 세대를 생성했습니다. FCS ExpressTM를 통한 배치 분석은 증식 지표의 정확성과 해석을 향상시켰습니다. 이 검증된 프로토콜은 돼지 면역학 연구에서 일관된 증식 데이터를 생성하는 신뢰할 수 있는 틀을 제공합니다. 핵심 요소 • 영구보관된 돼지 PBMC를 위한 최적화된 증식 측정: 면역학 연구 및 돼지 모델을 사용하는 생명 의학 연구에 이상적입니다. • Attune NxT 유세포 분석기로 정확한 획득 및 게이팅: CD4+ T 림프구의 정확한 식별 및 분석을 보장합니다. • FCS ExpressTM 7.18 소프트웨어를 사용한 강력한 데이터 분석: 림프구 증식 및 분열 지수의 신뢰할 수 있는 해석을 촉진합니다. • 효율적인 4.5일 프로토콜: 돼지 면역 세포를 포함한 임상 및 연구 환경에서 시기적절하고 재현 가능한 실험을 가능하게 합니다. 시각적 개요: 영구보관된 돼지 말초혈액 단핵구세포(PBMC)의 증식 측정 과정.