돼지 생식기 및 호흡기 증후군(PRRS)과 가성광견병(PR)은 각각 돼지 생식기 및 호흡기 증후군 바이러스(PRRSV)와 가성광견병 바이러스(PRV)에 의해 발생하는 전염성이 높은 질병입니다. 현재 상용화된 백신이 NADC30형 PRRSV 및 PRV 변종에 대해 제한적인 보호 능력을 가지고 있기 때문에, 이 두 바이러스의 동시 감염으로 인한 병리학적 손상은 중국의 양돈 산업에 큰 영향을 미칩니다. 본 연구에서는 HDR-CRISPR/Cas9D10A 시스템을 사용하여 GM-CSF와 NADC30형 PRRSV의 GP3 및 GP5 단백질을 융합 발현한 TK 및 gI/gE 결손의 재조합 PRV 균주 6종을 구축하였습니다. 성장 특성과 유전적 안정성을 평가한 결과, BHK-21 세포에서 GM-CSF, GP3, GP5 융합 단백질의 안정적인 증식 및 발현을 보이는 4개의 균주가 선택되었습니다. 생쥐에서 특이적인 체액성 및 세포성 면역 반응을 유도하는 능력을 평가한 결과, 면역원성이 우수한 두 균주가 선택되었습니다: rPRV-ΔTK-GP3-GP5-eGFP-ΔgI/gE-mCHERRY-B와 rPRV-ΔTK-eGFP-ΔgI/gE-GP3-GP5-mCHERRY-B. 이 균주들은 돼지 새끼에서 NADC30형 PRRSV 및 PRV 특이적 면역 반응을 증강시키고, 병리학적 손상을 줄이며, 증상 해결을 가속화하는 것으로 밝혀졌습니다. 일반적으로, PRV는 PRRSV 유전자를 발현하는 유망한 바이럴 벡터이며, 이 연구의 데이터는 PRRSV에 대한 새로운 후보 백신에 대한 참고 자료를 제공합니다.